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滅菌與消毒的方法: 物理方法: 加熱法(heating):快速,且對所有微生物都有效,利用熱打斷菌 ...
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Jan03Wed201815:08
微生物學-滅菌、消毒與化學治療
名詞解釋:
滅菌(sterilization):殺死所有細菌,達無菌狀態。
消毒(disinfection):殺死除了芽孢外的致病菌。
防腐(antisepsis):
抑菌(bacteriostasis):抑制細菌生長但不將其殺滅。
影響滅菌與消毒之因素:
時間:時間越長,效果越好。
溫度:每升高一度,殺菌力提升一倍。
濃度:濃度約高,效果越好,但酒精除外,其在70趴時殺菌力最好,增加濃度不能提升殺菌力。
微生物種類:有芽孢的菌株有明顯抗藥性,革蘭氏陽性菌對消毒劑都很敏感,有些伺機性致病菌(如綠膿桿菌)即結核分支桿菌例外。
微生物的生理狀態:對數期對消毒劑或物理滅菌耐受性較差,衰弱期或有芽孢時期抵抗力較大。
環境因素:酸鹼值影響。
滅菌與消毒的方法:
物理方法:
加熱法(heating):快速,且對所有微生物都有效,利用熱打斷菌體蛋白質三即結構之氫鍵,始知變性或凝固,又可分為濕熱法或乾熱法。
濕熱法:
煮沸法(boiling):通常為100度水中加熱10-15分鐘,芽孢不能完全被殺死,在沸水中加入2趴重碳酸鈉、硼砂、0.1N氫氧化納及1趴三磷酸鈉可提高沸點。
流動蒸氣法(flowingsteammethod):又稱間歇式滅菌法、丁達爾氏滅菌法,以100度流動蒸氣加熱30分鐘,連續三天,每天一次,適用於易被100度以上高溫破壞之物質。
高壓蒸氣滅菌法(autoclaving):再一大氣壓下水沸點為100度,若加壓至15磅/英吋平方,蒸氣溫度可升高至121度,此溫度保持15-20分鐘可殺死所有微生物,適用於易受乾熱法破壞成分之物品,如手術衣、紗布、手術器具,是現今最可靠、方便之滅菌方法,但不適用非水溶性物質之滅菌,如石蠟、油脂。
壓力與沸點關係:
水蒸氣壓力(磅/英吋平方)
溫度(C)
0
100
5
110
10
116
15
121
20
126
30
135
4.低溫消毒法:又稱巴斯德消毒法,在約62度的熱水中加熱30分鐘,常用於牛奶、酒精,在72度下連續加熱15秒有一樣的效果。
乾熱法:以火焰或高溫使細菌或微生物喪失活性或水分而死亡,多用於耐高溫之物品或可燃性廢棄物的滅菌,所需溫度較濕熱法高,時間也較長,因無水體存在,微生物之蛋白質較不易被熱凝固而變性,芽孢對乾熱之抵抗力較繁殖體為強。
蛋白質含水量與溫度關係:
蛋白質含水量(趴)
凝固溫度(C)
50
56
25
74-80
18
80-90
6
145
0
160-170
乾熱法:
乾熱滅菌法:以160度連續加熱3-4小時,美國要點規定,乾熱業菌法必須在170度下殺菌2小時,主要用於粉劑、油脂、石蠟、玻璃、金屬。
焚燒法(incineration):用於使用過的紗布、廢棄品、動物屍體等......是最有效的滅菌方式。
火焰滅菌法(directflamming):用於接種鉤、接種針、接踵環,試管之管口。
低溫抑菌法(lowtemperature):
可有效抑制微生物隻繁殖與代謝,嗜冷菌除外。
冷凍法(freezing):
微生物遇冷被殺死的原因有二:
微生物遭冷凍時,其表面有水的結晶形成,導致細胞內水分局部外溢,使細胞內電解質增加,導致某些蛋白質變性。
冷凍造成微生物細胞膜破裂,細胞內部物質外流而死亡。
冷凍並非理想的滅菌法,反而多用在保存菌種(添加甘油)
放射線(rediation):其可抑制細菌DNA複製,而達到抑菌、殺菌效果。
離子化放射線(ionizingradition):如X射線、Y射線、陰極射線,其能直接穿透微生物,使其內部水分離子化,產生一系列連帶反映,由於產生離子化放射線之機器昂貴,並未大量用於消毒滅菌上,但其是未來醫療用品、藥品、食物之良好滅菌消毒法,現用於塑膠手套、塑膠平板之滅菌。
非離子化放射線(nonionizingradiation):如紫外線,其穿透力較弱,易被玻璃、液體等減弱,故較適用於空氣、無孔洞平面物體之殺菌,常用於手術室、實驗室等空間的消毒。
過濾法(filtration):
適用於不耐熱的液體,常用於過濾細菌的濾膜孔洞直徑為0.45微米或0.22微米。
滲透壓(osmoticpreaaure):
高滲透壓為水分往體外排掉,黴菌較細菌能抵抗高滲透壓,故醃製食物無法防止長霉。
聲波震動(sonicvibration):
以每秒15000周波或更高頻率之超聲波震動,可破壞懸浮液中的菌體,使其內容物因細胞膜破壞而流出。
聲波耐受力比較:
革蘭氏陽性桿菌>革蘭氏陰性菌、球菌>桿菌,抗酸性分枝桿菌及細菌之芽孢亦有明顯較大之抵抗力。
化學方法:
化學消毒之作用原理:其是使用消毒劑,殺死致病性微生物隻繁殖體,但不含芽孢。
破壞細胞壁:細胞壁被破壞後大多數細菌皆無法正常生長,例;一些溶菌酶可溶解革蘭氏陽性菌之細胞壁,使之死亡。
改變細胞膜的通透性
使蛋白質變性
抑制酵素活性
破壞核酸、蛋白質
常用的化學消毒劑:此單元列舉的化學殺菌劑,對人體組織細胞的毒性強,主要用於醫療器械等器物的滅菌,化學治療劑(抗生素)之不同點在於選擇性毒性,消毒劑沒有選擇性毒性,只能外用,抗生素有選擇性,可以內服。
酚/石炭酸(phenol):
有破壞細胞膜使蛋白質變性和使微生物失去活性的能力。
李斯特最早運用石炭酸於外科手術之消毒。
酚對表面黏膜有刺激性,故較少使用於人體皮膚之消毒,多用於排泄物或病房的消毒。
目前石炭酸係數仍作為殺菌劑的殺菌能力指標。
石炭酸係數:是指以消毒劑與石炭酸分別於10分鐘內能殺死全部供試菌的最高稀釋度的比值。
六氯苯酚(G-11):酚的衍生物,皮膚消毒劑,可經由皮膚吸收,造成新生兒中樞神經抑制。
木焦油純:酚的衍生物,殺菌效果比石炭酸好,但溶解度低,其乳化物稱為來舒,一般作為居家環境之消毒劑。
鹵素類:
碘:強力氧化劑,能和微生物細胞之蛋白質或酶上的氨基酸分子作用,使之蛋白質或酶失去活性。
其對大多數細菌均有殺菌作用,同時對芽孢、黴菌、甚至病毒亦有很好的抑制作用,常用的含碘防腐劑為碘酒,但因刺激性強且不易清洗,故現在多將碘與PVP結合,稱為Betadine或優碘,是目前使用最廣泛且效果最好的皮膚消毒劑。
氯(chloride):強力氧化劑,氣體或其他結合化學物質的方式,被廣泛應用為殺菌劑,常用於食用水或游泳池水之消毒。
醇類(Alcohol):
醇類能使蛋白質變性並能溶解脂質,作用於細菌細胞膜和細胞壁的脂質,亦可使細菌脫水,因此對細菌、黴菌及部分有外套膜有殺滅或抑制作用,但對於無外套膜之病毒無效。
70%酒精殺菌力最強。
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