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論文名稱: 運用多目標基因演算法於退化性引子設計. 論文名稱(外文):, Degenerate Primer Design Using Multiobjective Genetic Algorithm. 指導教授: 李宗南.
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被引用:0點閱:575評分:下載:0書目收藏:0
在生物醫學界,單一核甘酸多型(SingleNucleotidePolymorphism:SNP)是目前重要的研究議題。
為了去了解SNP在基因的功能的影響,常常用Polymerasechainreaction(PCR)實驗來放大基因片段來做觀察。
為了要讓多條基因在一次的PCR實驗中同時作用放大,引子的設計便格外重要,除了一般目前所知的引子設計條件外,其退化度也不能過高,以達到節省實驗金錢以及時間的花費。
觀看目前已知退化型引子設計的軟體還有文獻,還沒有能夠設計出能夠符合所有引子設計條件並同時保持低退化度的引子。
我們在這篇使用多目標基因演算法來設計出一個有效率的軟體來找到這樣的引子來使用,並且我們利用容錯的機制,使用投票法來降低引子的退化程度。
我們使用了幾個基因組來驗証我們的程式能正確的找出能用的引子,在wetdock實驗中,我們也能確實放大目標基因的片段,証明我們的軟体找到的引子可以適合用在同時放大多條基因的實驗上。
Inthemedicalfield,SingleNucleotidePolymorphism(SNP)genotypingisanimportantgeneticstechnique.InordertoknowhowSNPaffectthefunctionofgene,toamplifySNPregionsoftheDNAsequencesisrequired.Manyresearchersprefertodesigndegenerateprimersforpolymerasechainreaction(PCR)experimenttoamplifythesesequences.FindingaprimersatisfiedallPCRdesignconstraintsandlowdegeneracyisimportanttosavetimeandmoney.However,theexistingapplicationscan’tdesignthedegenerateprimersatisfiedthedegenerateprimerdesignconstraintsatthesametime.Weproposeanefficientdegenerateprimerdesignalgorithmbasedonmultiobjectivegeneticalgorithm.Also,theproposedalgorithmusesthevotingschemetodecreasethedegeneracyofthedesignprimers.SeveralgenefamilycDNAsequencesandsequencevariantsareusedtoverifytheproposedalgorithm.Thedrydockexperimentalresultsshowthattheproposedalgorithmcanfinddegenerateprimersatisfiedasmanyconstraintsaspossibleandlowdegeneracy.
Content1.Introduction12.Backgroundmaterialsandliteraturereview42.1Backgroundmaterials42.1.1PCRandapplicationsofPCR42.1.2Thedegenerateprimerdesignproblem52.1.3Multi-objectivegeneticalgorithm52.2Literaturereviews93.Theconstraintsondegenerateprimerdesign113.1.Definitionoftheproposedalgorithm113.2ThePCRconstraints113.3Thedegenerateprimerconstraints154.Theproposedalgorithm174.1.Problemstatement174.2.Findingtheconservedregion204.3.Initialization204.4.Evaluation214.5.Selection214.6.Crossover234.7.Mutation244.8.Decreasingdegeneracy255.Discussion276.Experiments286.2.Wetexperiment337.Conclusion34REFFERENCES34
[1]Marth,G.,Yeh,R.,Minton,M.,Donaldson,R.,Li,Q.,Duan,S.,Davenport,R.,Miller,R.,andKwok.P.(2001)Single-nucleotidepolymorphismsinthepublicdomain:howusefularethey?.NatureGenetics,27,371–372[2]Mullis,K.,Faloona,F.,scharf,S.,Saiki,R.,Horn,G.,andErlich,H.(1986)SpecificenzymaticamplificationofDNAinvitro:thepolymerasechainreaction.InColdSpringHarbSympQuantBiol,51(pt1),263-73.[3]Kwok,S.,S.Y.Chang,J.J.Sninsky,andA.Wang,Aguidetothedesignanduseofmismatchedanddegenerateprimers.PCRMethodsAppl,1994,3(4),S39-47.[4]Zitzler,E.(1999)EvolutionaryAlgorithmsforMultiobjectiveOptimization:MethodsandApplications.Diss.ETHNO,13398[5]Schaffer,J.D.(1985)MultipleObjectiveOptimizationwithVectorEvaluatedGeneticAlgorithms.ProceedingsoffirstinternationalConferenceonGeneticAlgorithmsandTheirApplications,93-100.[6]Srinivas,N.andDeb.K.(1995)MultiobjectiveOptimizationUsingNondominatedSortinginGeneticAlgorithms,EvolutionaryComputation.2-3,221-248.[7]Goldberg,D.E.(1989)GeneticAlgorithmsinSearch,OptimizationwithVectorEvaluatedGeneticAlgorithmsandTheirApplications,93-100.[8]Aarts,M.G.,B.LintelHekkert,E.B.Holub,J.L.Beynon,W.J.Stiekema,andA.Pereira,(1998)IdentificationofR-genehomologousDNAfragmentsgeneticallylinkedtodiseaseresistancelociinArabidopsisthaliana.MolPlantMicrobeInteract,11(4),251-258.[9]Shen,K.A.,Meyers,B.C.,Islam-FaridiM.N.,ChinD.B.,Stelly,D.M.,andMichelmore,R.W.(1998)ResistancegenecandidatesidentifiedbyPCRwithdegenerateoligonucleotideprimersmaptoclustersofresistancegenesinlettuce.MolPlantMicrobeInteract,11(8),815-23.[10]Deng,C.andDavis,T.M.(2001)Molecularidentificationoftheyellowfruitcolor(c)locusindiploidstrawberry:acandidategeneapproach.TheoreticalandAppliedGenetics.103(2/3),316-322.[11]Giegerich,R.,Meyer,F.,andSchleiermacher,C.(1996)GeneFisher-softwaresupportforthedetectionofpostulatedgenes.ProcIntConfIntellSystMolBiol,4,68-77.[12]Kampke,T.,Kieninger,M.andMecklenburg,M.(2000),Efficientprimerdesignalgorithms,BIOINFORMATICS.[13]Linhart,C.andShamir,R.,(2002)Thedegenerateprimerdesignproblem,Bioinformatics,18,Suppl1,S172-81[14]Souvenir,R.,Buhler,J.,Stormo,G.,andZhang,W.(2003)SelectingDegenerateMultiplexPCRPrimers,Proc.IntWorkshoponAlgorithmsinBioinformatics(WABI),512–526.[15]Wei,X.,Kuhn,D.N.,andNarasimhan,G.(2003)DegeneratePrimerDesignviaClustering,Proc.ConfIEEEComputerSocietyBioinformatics,75-83,Stanford,CA,August.[16]Sambrook,J.andRussell,D.W.(2001)MolecularCloning3rd,ColdSpringHarborLaboratoryPress,NewYork.2,8.1-8.126.[17]McPherson,M.J.,Quirke,P.andTaylor,G.R.(1993)PCR:APracticalApproach.OxfordUniversityPress,NewYork.[18]Srinivas,N.andDeb,K.(1995)MultiobjctiveOptimizationUsingNondominatedSortinginGeneticAlgorithms,EvolutionaryComputation.2-3,221-248[19]Deb,K.,Pratap,A.,Agarwal,S.,andMeyarivan,T.(2002),AFirstandElitistMultiobjectiveGeneticAlgorithm:NSGA-II.ProcIEEETransactionsonEvolutionaryComputation,6,NO.2.182-197.[20]Liu,T.K.(1997)ApplicationofMulti-objectiveGeneticAlgorithmstoControlSystemDesign,DoctorialThesisofGraduateSchoolofSciences,TohokuUniversity,Japan.[21]HigginsD.,ThompsonJ.,GibsonT.ThompsonJ.D.,HigginsD.G.,andGibsonT.J.(1994)CLUSTALW:improvingthesensitivityofprogressivemultiplesequencealignmentthroughsequenceweighting,position-specificgappenaltiesandweightmatrixchoice.NucleicAcidsRes.22,4673-4680
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