[陽明大二細胞生物學]膜蛋白 - TINY Notes

1. integral protein：鑲嵌在膜，且有一段以上區域橫跨膜(結構上多α ... GPI anchored protein：整段位於脂肪雙層外，以共價鍵與醣蛋白的醣類聯結. 個人介紹 醫學 大學 國考專區 生活日誌 Tiny100 文學 公告 投稿專區 留言版 2014年1月26日星期日 [陽明大二細胞生物學]膜蛋白 標籤： 大學-胞生/組織, university 一‧分類 1.      integralprotein：鑲嵌在膜，且有一段以上區域橫跨膜(結構上多αhelix)，裸露在cytosol與ECM為親水性(約占細胞轉譯蛋白的30%) 2.      peripheralprotein：整段位於脂肪雙層外，以『非共價鍵』黏附在膜或蛋白上 3.      lipidanchoredprotein：整段位於脂肪雙層外，以共價鍵與lipid聯結 4.      GPIanchoredprotein：整段位於脂肪雙層外，以共價鍵與醣蛋白的醣類聯結 二‧integralprotein 1.      特性： a.       為amphipathic，跨膜處為疏水性，膜外側為親水性 b.      依據跨膜片段數量可分成『singlepass』與『multipass』 c.       功能：電子傳遞鏈的媒介；離子通道；接收訊息的受器 2.      研究方法：(很雜==) a.       困難點：因為有跨膜的片段，純化較其他蛋白質複雜 b.      FreezeFractureAnalysis →將膜冰凍後，從中間切開，利用金屬附著後用電顯觀察 →可以觀察這些蛋白質的分布狀況 c.       Detergent：integral protein的純化 →因為detergent與脂質同樣是amphipathic，可以取代磷脂質，將蛋白質溶解，以利作後續的分析 →detergent分成兩種： ※   ionicdetergent：SDS →帶有電荷，純化過程中，破壞離子鍵與氫鍵而使蛋白質變性 ※   nonionicdetergent：TritonX-100，β-octylglucoside →不帶電荷，不影響蛋白質的三級結構 d.     reconstitution：重組 →利用非離子性detergent，萃取特定蛋白質 →去除detergent後，加入phospholipid →重組，得膜上只有特定蛋白的vesicle e.      X光繞射：得3D結構，困難!!!! →純化出來的蛋白質可以利用X光繞射判定其結構，但成功的並不多 f.      由氨基酸序列預測蛋白質的結構： →通常transmembrane為疏水性，若有連續20幾個nonpolar氨基酸，可以預測為αhelix結構 →畫出序列的hydropathyplot，判斷出穿膜的domain g.     利用trypsin來判斷膜兩側的差異性： →先分離所以膜上的蛋白質，跑SDS電泳，作為對照組 →加入trypsin，分離膜上蛋白跑電泳，經對照判斷哪些在胞外有domain h.     利用mutation，引入cysteine協助判斷domain的相對位置 →利用基因工程，將特定的氨基酸換成cysteine，若被換的domain可以形成雙硫鍵，表示這兩個domain極為靠近 →此外，也可在SH接上NO，利用其未成對電子對光譜的影響，了解domain的位置與移動，稱為EPRmethod 三‧研究peripheralprotein →一般利用靜電力形成鍵結，故可加入高濃度鹽類萃取之 →在cytosol側的peripheral protein會形成網狀結構，固定integralprotein 以電子郵件傳送這篇文章BlogThis！分享至Twitter分享至Facebook分享到Pinterest 沒有留言: 張貼留言 較新的文章 較舊的文章 首頁 訂閱： 張貼留言(Atom) 著作人 Unknown 微旅時刻TinyTravel 搜尋此網誌 Translate 粉絲專頁連結 熱門文章 [搶救OSCE大作戰05]上肢無力與神經學檢查(投稿者：蔡奇桓) [陽明大一分析化學]chapter9,10 第9章：平衡(大部分是高中，背英文吧)1.     conjugateacid：共軛酸2.     amphiprotic：兩性物質：可以是質子受體/以可為質子予體3.     zwitterion：asp... [陽明大二細胞生物學]內膜系統與高基氏體 一‧內膜系統的研究1.     cellfreesystem：→將胞器從細胞中分離，並加入足夠的原料觀察其反應→ex.發現vesicle的budding 總網頁瀏覽量